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Biochemie (Subject) / Genetik (Lesson)
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- Restriktionsenzyme Gentechnik: REN werden verwendet um DNA zu spalten --> stickyends bleiben übrig und fremde DNA wird in ein anderes Genom geschleust um somit einen Organismus dazu zu bringen fremde Proteine zu synth. (--> Folgeeffektbeobachtung) Analytik: REN entfernen pallindromfragmentierungsmuster der DNA dann elektrophroretische Darstellung
- Plasmide Transport vehikel für Gene für neu einzubringendes genetisches Material damit kann man DNA- Rekombination (austauschen von Plasmiden) machen (ringförmige DNA in bakterien)--> verschaffen bakterien überlebensvorteile Resistenzgene
- Klonieren (insulin) z.B möchte ich das ein Molekül Insulin produziert ich entferne durch REN das DNA Gen für Insulin und setze es in ein Plasmid ein (ligase verbindet) ich füge die Plasmide zu Bakterien hinzu --> kurzer Elektroschock --> Bakterium mit neuem Gen f Insulin wächst Jedes Plasmid hat Resistenz --> darum zugabe von Antibiotikum --> Bakterien ohne Resistenz sterben --> nur Bakterien mit dem jeweiligen Plasmid überleben nun können alle Bakterien Insulin produzieren
- Blot Nothern Blot = RNA - Nachweis Southern Blot = DNA - Nachweis Western Blot = Nachweis eines Konkreten Enzyms Pool an Prot wird auf A.rose Gel aufgetragen --> Spannung angelegt --> Blotting aufgelegt --> auf dem Papier sieht man Banden AK binder komplementär an Protein das ich suche .... usw
- PCR (polymerase chain reaction) vervielfältigung d DNA (Kopie) zum DNA Nachweis (Kriminalanalyse) trennung d DNA durch HItze & RNA-Primer zugabe (dockt an zielstelle an) = DENATURIERUNG DNA-Polymerase (Hitzeszabil) kann komplementär die DNA synthetisierem = PRIMER HYBRIDISIERUNG dann Temperaturabhängiger Stopp --> Auftrennung d Tochterstränge --> gleicher Vorgang nochmal = DNA -SYNTHESE
- Nukleotide Funktion Nukleinsäuren (RNA, DNA) Energieträger (ATP) SIgnaltransduktion (NAD, FAD) Aktivierung (UDP, CoA)
- Aufrechterhaltung der Nukleotid Konzentration durch De-Novo-Synthese und wiederverwertung
- Organische Basen Purin Basen (6er&5er-Ring) Adenin und Guanin Pyrimidin Basen (6er Ring zuerst Ring synthetisiert dann Ribose angeh) Cytosin, Thymin(+Methylgruppe), Uracil
- Nukleotide Base + Ribose + P z.B. Adenosin - Mono - Phosphat (AMP)
- Purin (Biosynthese) 1) aktivierung der Ribose (Ribose5P --> (ATP-AMP) Phospho-ribosyl- pyro P (PRPP) 2) Schrittmacher: PRPP --> (PRPP-Glutamin-Amido-Transferase) (Glutamin-Glutamat +2P) --> Phospho-Ribosyl-Amin 3) Synthese d Ringsystems bis IMP (Inosin-MonoP) Inosin = Hypoxanthin + Ribose
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- Purin Biosynthese Molekül (purinbase) hat C aus CO2 C-C-N aus Glycin C +C aus Formyl-THF N-N aus Glutamin N aus Aspartat + RIbose
- Synthese des Purinringsystems Hypoxanthin --> (NAD-NADH2) --> XMP --> (ATP-AMP+2P) (+N aus Glutamin) --> GMP --> (GTP-GDP+P) (+N aus Aspartat) --> AMP
- Synthese des Purinringsystems Hypoxanthin --> (NAD-NADH2) --> XMP --> (ATP-AMP+2P) (+N aus Glutamin) --> GMP --> (GTP-GDP+P) (+N aus Aspartat) --> AMP