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Praktikum Biochemie 2 (Subject) / Praktikum Biochemie 2 (Lesson)
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- IgG (!) 75% der Immunglobuline im Blut plazentagängig Monomer
- IgM (!) erstes Ig auf der Oberflächer der B Zelle Pentamer Aviditätseffekt = Summe aller affinitäten zw antikörper und antigen
- Immunschwäche Immundefekt veränderte aktivität/Funktion von enzymen
- verstärkte immunreaktion überproduktion von antikörpern bei maligner entartung antikörper produzierender Zellen erhöhter spiegel bei allergien Antikörper gegen körpereigene Substanzen bei Autoimmunerkrankung bei transplantiertem organ
- Agammaglobulinämie niedriger Ig spiegel durch störung in der Differenzierung der B-Lymphozyten therapierbar durch Verabreichung von Antikörpern
- hypoalbuminämie abnormal gerniger Albuminspiegel als folge von Leberschädigung oder durch fehlende Rückresorption
- Speichel Bestandteile (!) wasser 99,5% organische und anorganische bestandteile: Glycoproteine amylase antikörper Lysozym Ionen
- funktionen speichel befeuchtung mundhöhle einschleimen nahrung antibakterielle wirkung vorverdauung mineraisierung zahnschmelz Wundreinigung
- Lysozym (!) bakterizides agens gegen gram positive Bakterien spaltet Polysaccharid ketten in zellwandkomponente polypeptidkette aus 129 AS 4 Disulfidbrücken in Sekrete dder Atemwege Tränenflüssigkeit und speichel
- alpha amylase spaltet amylose in speicheldrüsen und pankreas produziert ph ooptimum organabhängig temp. optimum > 30 ° erhöhte aktivität bei versch krankheiten
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- speichel analytik dient diagnostik und nachweis von hormonen und wirkstoffen
- Kolorimetrische Quantifizierung von Proteinen: Biuret - Methode für verbindungen mit min zwei peptidbindungen die in basischer lösung ein komplex mit Cu2+ bilden über freie elektronen des Stickstoffs intensität der violett färbung nimmt mit anzahl der peptidbindungen zu -> propotional ist photometrisch messbar
- Elektrophorese durch versch wanderungsgeschwindigkeiten von teilchen im elektrischen feld gemäß ihrem verhätnis von masse zu ladung
- Denaturierene Protein Elektrophorese (SDS PAGE) (!) SDS ist ein anorganisches Detergens - denaturiert Proteine - bringts in Lösung - bindet an prptidrückgrat stark negativ geladen (geringe eigenladung des proteins wird dadurch maskiert) -> konstantes verhätnis von ladung zu masse werden währen Gelelektrophorese gemäß ihre Molmasse aufgetrennt wird mit Mobilität von bekannten proteinen verglichen (=Marker) Denaturierung durch erhitzen der proben zusätzlich verstärkt Disulfidbrücken durch Reduktionsmittel wie Dithiothreitol gespalten
- Aufbau SDS PAGE (!) zuerst Sammelgel -> dort findet Fokussierungn statt ein schnelles leition das bremst kleine proteine und langsame folgeionen schieben große proteine vor sich her dann Trenngel -> hier erfolgt die Auftrennung nach molekulargewicht weil unten + pol und de proteine negativ geladen
- relative mobilität in halb logarithmischer skala linearer zusammenhang je größer Molekulargewicht desto geringer die mobilität relative mobilität = Migration der Bande X / Migration der Farbstoff-Front
- reduzierende Agenzien (!) können disulfindbrücken in proteinen spalten zB beta - mercaptoethanol pder DTT dithiothreitol