Zellbiologie (Subject) / Methoden der Zellbiologie (Lesson)
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Methoden zur Darstellung zellulärer Bestandteile
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- Cytochemie - nach Abtötung der Zelle bleiben Strukturen erhalten - chemische Gruppen im Zellmaterial gehen spezifische Reaktionen mit best. Farbstoffen ein
- Immunfluoreszenz - Antikörper (gegen best. Antigene gerichtet) werden mit Fluoreszenz-Farbstoffen markiert - Antigene werden durch Ausbildung von Antigen-Antikörper-Komplexen sichtbar - zur Auffindung & Zuordnung zellulärer Strukturen in der lebenden Zelle
- Isotopenmarkierung - weitere Methode zur Auffindung & Zuordnung zellulärer Bestandsteile in der lebenden Zelle - anschließend erfolgt Autoradiographie (z.B Zuordnung der rRNA-Synthese zu akrozentrischen Chromosomen)
- Ultrazentrifugation - Analyse einzelner Zellstrukturen - Zellen zunächst homogenisiert, Zellmembran wird geöffnet (z.B. durch Enzyme) - differenzielle Zentrifugation trennt zunächst die Kerne ab (größte & schwerste Zellpartikel) - Überstand: alle anderen Zellbestandteile -> werden erneut stärker zentrifugiert -> Mitochondrien & Plastiden setzen sich ab - erneute Zentrifugation des Überstandes -> Mikrosomen (z.B.Ribosomen) setzen sich ab - Überstand der löslichen Fraktion: z.B. gelöste Proteine