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LMC (Fach) / Milch (Lektion)

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• Unterscheidung von Milch anhand des Fettgehaltes Vollmilch: 3,5%  Fettarme Milch :1,5-1,8% "teilentrahmte Milch" Magermilch: max. 0,5 % Fett "entrahmte Milch
• Fettbestimmung nach Gerber Welche Schritte laufen ab? Welches Gerät wird verwendet? Was wird abgelesen? Welche Chemikalien werden dazugegeben? Warum? Freisetzen des Fetts aus den Proteinmembran durch sauren Aufschluss (Denaturierung und Hydrolyse der Peptide) Abtrennen des Fetts durch ZentrifugationVerbesserung der Phasentrennung durch Amylalkohol Es wird ein Butyrometer verwendet: Gummistopfen zum sicheren verschließen, Skala zum ablesen des prozentualen Fettgehaltes Butyrometer wird mit H2SO4, Milch und Amylalkohol befüllt (Flüssigkeiten nicht vermischen u. Hals nicht benetzen!) Überkopfschwenken, Zentrifugation, prozentualen Fettgehalt auf der Skala ablesen
• Peroxidasenachweis Was ist Peroxidase? Wozu dient der Nachweis? Peroxidase ist vorherrschendes Enzym der Milch Inaktivierung durch Erhitzung auf 85 °C für 10 sec (Indikator für Hocherhitzung)
• Peroxidasenachweis Welche Reaktion läuft ab? Wie ist die Auswertung? Peroxidase spaltet atomaren Sauerstoff von Peroxiden abund überträgt ihn auf leicht oxidierbare Stoffe Peroxidase reduziert H2O2 und setzt Sauerstoff frei Oxidation von Paraphenylendiamin bei Anwesenheit von Peroxidase zum blau gefärbten p-Chinondiimin (blau) Blaufärbung: positiver Nachweis, Milch wurde nicht hocherhitzt(aber evtl. Kurzzeit- oder Dauererhitzt)
• Phosphatasenachweis Vorkommen? Was wird nachgewiesen? Unterschiedliche Phosphatase? Vorkommen: Fettkügelchenmembran Nachweis: Kurzzeit- oder Dauererhitzung saure Phosphatase ist hitzestabil (Inaktivierung > 90°C) alkalische Phosphatase ist hitzelabiler
• Phosphatasenachweis Durchführung und Auswertung Milch wird mit Phosphorsäurephenylester versetzt --> bei Anwesenheit von Phosphatase wird Phenol freigesetzt --> Nachweis des Phenols unter Bildung eines blau gefärbten Adukts Blaufärbung: positiver Nachweis, Milch wurde nicht kurzzeit- oder dauererhitzt
• Bestimmung des Säuregrades der Milch (Soxlett-Henkel) Wozu dient das? Nachweis der Frische einer Milch bzw. evtl mikorob. Kontamination: pH-Wert frischer Milch: 6,5-6,75
• Definition Säuregrad mL 0,25 M NaOH, die benötigt werden um 100 mL Produkt unter Verwendung des Indikators Phenolphthalein auf den Farbton des Farbstandards zu titrieren als Orientierung dient Farbstandard: Milch mit Kobaldsulfatlösung
• Wie kann Verwässerung von Milch (Verbrauchertäuschung!) nachgewiesen werden? Isolierung des Milchserums (Abtrennuen des Eiweiß durch Zusatz von CaCl2 und erhitzen Bestimmung der Refraktion (Brechungsindex bei 17,5 °C) AUSSERDEM: Nachweis durch Bestimmung des Gefrierpunktes (bei Milch konstant zwischen -0,53 und -0,55 °C)
• Messprinzip: Refraktion des Milchserums tritt ein Lichtstrahl von einem optisch dünneren Medium (z.B: Luft) in ein optisch dichteres Medium (z.B: Milchserum), wird der Lichtstrahl zum Lot hin gebrochen. → Brechungsindex ist charakteristisch für die optische Dichte Es gilt das Snellius'sche Brechungsgesetz: sin alpha/sin beta = c1/c2 0 n dabei ist c die Lichtgeschwindigkeit im Medium
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• Durchführung des Nachweises von Tetracyclinen nach § 64 Methode (amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren) anwendbar für Fleisch, Fisch, Milch, Ei, Honig Durchführung:  Extraktion aus Probenmaterial mit Succinat-Puffer Aufreinigung über Kupfer-Chelat-Säule Anreicherung über SPE Bestimmung mittels HPLC-DAD
• Wie funktioniert die Aufreinigung über Kupfer-Chelat-Säule? Chromatographiesäule mit Chelating-Sepharose befüllt wird mit Kupfersulfat befüllt Tetracycline binden an Cu2+ Störverbindungen können eluiert werden Probenelution mit EDTA-Succinat-Puffer
• Wie funktioniert die Aufkonzentrierung mit SPE? Konditionierung der Kartusche Probenaufgabe (EDTA-Succinat-Puffer) Waschen Elution mit Ethanol Einengen auf 1 mL

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