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Molekularbiologie (Subject) / Klonierung (Lesson)

klonen

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  • Definition cloning Methoden zur Gewinnung und identische Vervielfältigung von DNA
  • Definiton Klonen Herrstellung genetisch identischer Organismen
  • Prinzip gewünschtes DNA-Fragment in einen Vektor(Genfähre) einbauen
  • Ziel DNA vermehren.... .....zur Untersuchung der Eigenschaften der DNA ... um die DNA in weiteren Prozessen zu untersuchen ... Genübertragung zw. Organismen ... zur Produktion von Proteinen, die von der DNA kodiert werden
  • Verfahrensschritte Herstellung des rek. DNA-Moleküls Transformation und Selektion Plattieren der E.coli-Suspension auf Testmedium
  • Welche DNAasen (schneiden DNA) gibt es? Exonucleasen Endonucleasen (sequenzspezifisch, sequenzunspezifisch)
  • Wozu dient das Restriktionsmodifikationssystem? =RN-System nur in Bakterien Schutz vor invasiver DNA methyliert die eigene DNA an bestimmten Sequenzen durch Methylase
  • RE? Erkennen definierter Basensequenzen auf der DNA
  • Verbindung RE und Methylase "Pärchen" aus RE und dazugehöriger Methylase das RE schneidet die eigene DNA nicht, da sie durch  Methylase identifiziert wurde fremde DNA, die dieses Methylierungsmuster nicht hat, wird durch RE zerschnitten
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