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Biochemie ELW (Subject) / Molekularbiologie (Lesson)

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• Richtig oder Falsch? Die Basenpaarung A-T ist stabiler als G-C Falsch Die Basenpaarung G-C ist stabiler als A-T, da dort 3 H-Brücken gebildet werden statt 2
• Richtig oder Falsch? Wenn DNA schmilzt nimmt die Extinktion ab Falsch sie nimmt zu
• Was sind Topoisomerasen? Enzyme die die Anzahl der Windungen (--> Superspiralisierung) einer zirkulären Doppelhelix in einem 3stufigen Prozess verändern Spaltung einer oder beider Stränge Passage eines DNA-Segments durch die Bruchstelle Verschluss der Bruchstelle
• Welche Topoisomerasen kennst du? Topoisomerase I führt Einzelstrangbrüche durch und entfernt negative Supercoils Topoisomerase II (Gyrase) führt Doppelstrangbrüche durch und katalysiert die ATP getriebene Einführung negativer Supercoils
• Richtig oder Falsch? Die DNA-Polymerase kann keine de novo Synthese durchführen Richtig
• Welche Reaktion katalysieren die DNA Polymerasen? DNAn + dNTP ---> DNAn+1 +PPi Es wird ein Primer benötigt
• Aufgaben der a) Pol III b) Pol I a) synthetisiert den Hauptteil der DNA 3'-5' Exonuklease Aktivität = Korrekturlesefähigkeit b) entfernt den Primer und füllt Lücken auf 5'-3' Exonuklease Aktivität
• Ligasen Verknüpfen zwei DNA Enden über Phopsphodiesterbindungen zwischen 3'-OH und 5'-Phosphat. Keine Verknüpfung von Einzelsträngen in E.coli/Bakterien unter NAD+ in tierischen Zellen unter ATP Verbrauch
• Was versteht man unter single strand binding proteinen SSB? Einzelstrangstabilisierende Proteine ...werden nach Entwindung der DNA durch Helikasen eingefügt um DNA-Einzelstränge zu stabilisieren
• In welche Richtung erfolgt die DNA Synthese? 5'-->3' Richtung
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• Was sind reverse Transkriptasen? RNA-abhängige DNA-Polymerasen benötigen Primer synthetisieren DNA an einer RNA Matritze in 5'-->3' ---> ermöglichen die Vermehrung von Organismen die RNA statt DNA als genetische Information besitzen
• Wie ist es möglich, das die Replikation eukaryotischer Zellen so schnell abläuft? Mehrere Initiationspunkte (=Startpunkte) es wird von vielen Stellen aus in beide Richtungen repliziert
• Richtig oder Falsch? Negative Supercoils erleichtern das Öffnen der Doppelhelix, positiven erschweren es Richtig
• Was sind Restriktions(endo)nukleasen? Enzyme, die aus Bakterien gereinigt werden und die DNA-Doppelhelix an ganz bestimmten Stellen schneiden
• Definition Plasmide kleine, ringförmige, autonom replizierende DNA-Moleküle in Bakterien und Hefen tragen zusätzliche genetische Information (Bsp.: Antibiotikaresestenzen) liegen in größerer Stückzahl vor und ermöglichen damit die Bildung größerer Mengen eines Gens oder Genproduktes
• Was versteht man unter der PCR? Verfahren zur Vervielfältigung von Nukleinsäuren   Polymerase-Chain-Reaction Polymerase wird gezielt zur Synthese eines speziellen DNA-Abschnitts eingesetzt
• Was versteht man unter Klonierung und was ist ihr Ziel? Gewinnung und identische Vervielfältigung von DNA Einbau eines DNA-Segment in eine selbstständig peplizierendes DNA-Molekül, sodass das DNA-Segment mit repliziert wird   Ziel: Genügend Material für eine Untersuchung oder Genexpression zu bekommen
• Wie wird das DNA-Segment in den Plasmid eingebaut bei der Klonierung? DNA und Plasmid werden mit derselben Endonuklease behandelt ("Stücke herausgeschnitten") Auf Grund der sticki ends kommt es zu einer Affinität der einsträngigen Enden zueinander. DNA wird in Vektor eingebunden. Ligasen verbinden die Enden
• Wie erfolgt die Selektion der Plasmiden am Ende der Klonierung? Bakterien, die den Plasmiden aufgenommen haben sind restistent gegen Antibiotika
• Was ist cDNA? DNA, die mittel des Enzyms reverse Transkriptase aus RNA synthetisiert wird
• Richtig oder Falsch? Die RNA-Polymerase benötigt keinen Primer richtig DNA-Pol benötigt einen

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