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Anchem (Subject) / acnchem new (Lesson)
- EI Vorteile hohe Empfindlichkeit (sub Picomol bis Picomol) große Datenbanken <200.000 organischen Molekülen Info zur Analytstruktur aus Fragmentmustern
- Nachteile EI m/z Bereich begrenzt Flüchtigkeit des Analyten erforderlich mögliche Zersetzung durch Verdampfung bei starker Fragmentierung oft kein Molekülion detektierbar
- ESI Vorteile (7) m/z Bereich bis 150.000Da mittlerer Femtomolbereich Mehrfachladungen der Moleküle gibt gute Richtigkeit der molekularen Masse Weichste D/I-keine Fragmentierung keine störenden Hintergrundionen online Kopplung gut mögilch (mit HPLC und CZE) für sehr große Moleküle verwendbar (m/z bis 4000)
- ESI Nachteile 4 niedrige Salz- und Detergenztoleranz hohe Probenreinheit erforderlich Mehrfachldungen machen eine Analyse on Molekülgemischen zuweilen schwierig Diskriminierung schwer ionisierbarer Komponenten möglich
- MALDI Vorteile 4 m/z Bereich bis 300.000Da weicher D/I, kaum Fragmentierung sehr hohe Empfindlichkeit, niedrigerer Femtomolbereich Analyse komplexer Gemische ist sehr gut möglich (kaum Fragmentierung und nur einfach geladene Ionen)
- MALDI Nachteile 5 niedrige Auflösung im m/z Bereich >15.000Da oft störender Matrix-Hintergrund im Bereich unter 1000Da Diskriminierung schwer ionisierbarer Komponenten häufig Quantifizierung nur beschränkt möglich Photoabbau der Analyte durch Laserbestrahlung möglich
- allgemeine Charakteristika von Immunoassays Einschränkung durch Notwendigkeit die Tertiärstruktur von AK zu erhalten Kaum Probenvorbereitungsschritte wg. der Selektivität der Ag-AK-Wechsenirkungen Unsicherheitsbereich der Resultate:Präzision: relative Standardabweichung im Labor <5%Richtigkeit: systematische Fehler durch Kreuzreaktivität der AK Kosten (Instrumentation, Reagentien, Personal, Qualtitätskontrolle) Zeitbedarf wg. der Möglichkeit der Parallelbestimmung niedrig
- Immunoassays Kosten Personal: niedrig, da Methoden automatisierbar Reagentien: einezelne AK teuer, Kosten pro Bestimmung niedrig Instrumentation: oft billig, abhängig von Detektionsmethode Qualitätskontrolle: wie bei anderen Verfahren
- Immunaffinitätschromatographie Immobilisierung Probenaufgabe Waschen Elution (Herauslösen von Substanzen aus stat.Phase) Regeneration
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