Ascorbinsäuregehalt nach Tillmann
reduzierende Wirkung von Ascorbinsäure Titration mit 2,6- Dichlorphenolindophenollösung => 2,6- Dichlorphenolindophenol-Leukoform Reagenz dient als Indikator
3 Schritte zur Bestimmung des Ascorbinsäuregehaltes
-Titer der DI-Lösung -Blindwert bestimmen -Fruchtsaft bestimmen
Wozu Titerbestimmung?
es muss bestimmt werden, wieviel mg Ascorbinsäure von 1 mg Di-Lösung oxidiert wird
Wie wird ein Ascorbinsäurestandard bestimmt?
1. Herstellung Ascorbinsäurestandards 2. 0,2 ml Ascorbinsäurestandard wird in 20 ml Oxalsäure gelöst und bis zur schwachen Rotfärbung titriert
Blindwert, was wird in diesem Fall daraus bestimmt?
über den Blindwert werden ggf. Verunreinigungen in Oxalsäure ermittelt
Wie wird der Blindwert bestimmt?
0,2 ml und 20 ml Oxalsäure DI bis Rosafärbung
Durchführung Blindwertbestimmung
0,2 ml und 20 ml Oxalsäure DI bis Rosafärbung
Formel Titer
F = Z / (a-b) Z: Ascorbinsäuregehalt in 0,2 ml Standard a: Verbrauch DI-Lösung Standard b: Verbrauch DI-Lösung Wasser
Wie wird schließlich der Ascorbinsäuregehalt bestimmt?
Asc = V * F
Wann, wie und woraus entsteht HMF?
Erhitzung von Hexosen durch Wasserabspaltung
Reaktion zur Photometrischen Bestimmung von HMF
HMF bildet mit Barbitursäure und p-Toluidin roten Farbstoff
IMER
imobilized enzyme reactor
Wie ist Eluent bei HPLC-IMER?
mobile Phase aus einem oder mehr Lösungsmitteln, Carbonatpuffer, pH 9,1
Was ist Biosensor?
Biosensoren beruhen auf räumlicher Kopplung eines immobilisierten biologischen Systems mit einem Signalumwandler => Enzym Sulfoxidase
HPLC-IMER
3 Teile
HPLC-Chromatographie: Trennung Biosensor mit Sulfoxidase: Entstehung H202 elektrochem. Detektor: Detektor H202
Wie erfolgt Quantifizierung?
Kalibirierkurve: Standardlösungen unterschiedlichen Konzentrationen
Was ist Einpunktkalibierung?
eine Standardlösung mit def Sulfitkonzentration
Wie kann man von Peakfläche auf Konz in Probe mit Standard schließen?
Dreisatz Probe ? Peak 1 Standard 1 mg Peak 2 => Probe = 1 mg / Peak 2 * Peak 1
7 Vorteile So2-Bestimmung mit HPLC-IMER
-geringe Aufarbeitung -selektiv und empfindlich -schnell -umweltfreundlich -ppm- Bereich -Enzyme wiederverwendbar -Lager- und Arbeitsstabilität
2 Nachteile SO2 mit HPLC-IMER
-Trennprobleme -Kalibration
Patulin
Def Auftreten
-Mykotoxin der Arten Penicillum, Aspergillus, weitere -fauliges Kernobst
Patulin
Eigenschaft
Höchstmenge
Nachweis
-hitzebeständig => keine Beeinflussung durch Pasteurisation -max 0,05 mg/kg Nachweis: Extraktion Ethylacetet HPLC-UV-Detektion