P-Elemente
Verwendung: Transgenese Mutagenese Inverse PCR Isolierung von P-Element benachbarter genomischer DNA Enhancer-Trap Richtige Aussagen: P-Elemente, in denen ein iverted repeat defekt ist, lassen sich nie mehr mobilisieren P-Elemente sind bei Drosophila die am häufigsten für die Transgenese verwendeten Transposons P-Elemente bestehen aus inverted repeats und einem Transposase Gen P-Elemente können ebenso wie Röntgenstrahlen und chemischen Mutagenen zur Erzeugung von Mutationen genutzt werden für die Enhancer-Trap-Technik verwendete P-Elemente enthalten kein Transposase-Gen P-Elemente können an beliebigen Stellen ins Genom integrieren P-Elemente gehören zur Familie der mobilen genetischen Elemente, den sog. Transposons mithilfe der Technik plasmid rescue ist es möglich, den Integrationsort eines Elementes im Genom zu ermitteln bei der Enhancer-Trap-Methode kommen P-Elemente zum Einsatz für die Transgenese bei Drosophila muss das verwendete P-Element in Zellen der Keimbahn integriert sein
Genkartierung
zur Kartierung einer Mutation auf ein bestimmtes Chromosom verwendet man dominante Markergene Der Abstand zweier auf dem gleichen Chromosom gelegener Gene wird in centiMorgan (cM) angegeben mit steigendem Abstand zwischen zwei Genen steigt auch die Wahrscheinlichkeit von Mehrfach-cross-over-Ereignissen um die Lage eines Gens eingrenzen zu können, verwendet man Kartierung mittels Defizienzen zehn cM entsprechen 10% Rekombinationswahrscheinlichkeit Die Chromosomen-in-sitru Hybridisierung basiert auf der komplementären Basenpaarung zwischen DNA und Sonde die Nachweismethode bei der Chromosomen-in-situ-Hybridisierung bezeichnet man als indirekt Das Genom von Drosophila ist zu rund 95% durch Defizienzen abgedeckt
Segmentierungsgene
Bicoid, nanos, hunchback und caudal sind Koordinatengene Bicoid wirkt als Transkriptionsfaktor und Translationsrepressor nanos ist ein maternales Gen nanos hemmt die Translation der hunchback RNA hunchback ist ein Zielgen von Bicoid Bicoid hemmt die Translation der caudal-mRNA der Verlust von Bicoid führt zur Verdopplung posteriorer Strukturen hohe Hunchback-Konzentrationen reprimieren die Expression von Krüppel Für die Ausprägung des Phänotyps der Koordinatengene ist das Genom der Mutter entscheidend Die Expression der Segmentpolaritätsgene fixiert die Parasegmentgrenzen die Expression der Paarregelgene wird von den maternalen und den Gap-Genen reguliert die Expression der homöotischen Gene wird von Gap- und Paarregengenen aktiviert Mutationen in Segmentpolaritätsgenen verändern die Polarität innerhalb eines Segmentes Mutationen in Gap-Genen führen zum Verlust mehrerer zusammenhängender Segmente engrailed ist ein sogenanntes Selektorgan, welches in jedem Parasegment anterior exprimiert wird engrailed definiert je Segment das posteriore Kompartiment Parasegmente bestehen aus dem posterioren Anteil eines Segments und dem anterioren Anteil des darauffolgenden Segments
