1. Zellen werden in blauviolettem Farbstoff gefärbt 2. Zugabe einer Iodlösung zur Fixierung des Farbstoffs (Umwandlung in Farblack) 3.Spülung mit Ethanol (Alkohol) zur Differenzierung, Farbstoff wird aus der Zelle gezogen

⇒Gram positive Zellen: Zellwand besteht aus mehrschichtigem mureingerüst. Farblack lässt sich auch nicht mit Alkohol aus der Zellwand herauslösen

⇒Gram negative Zellen: Zellwand besteht aus einschichtigem mureingerüst. Blauer Farbstoff wird zunächst aufgenommen, Zellen werden mit Alkohol gespült. So geben Gram negative Zellen den Farbstoff schnell ab