Lernfeld 6 - molekularbiologisches Arbeiten und Biochemie (Fach) / Genetik von Bakterien und Eukaryonten (Lektion)

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• Wie unterscheiden sich DNA und RNA? - die RNA hat statt der Desoxyribose die Ribose (hat eine OH-Gruppe mehr)- statt Thymin wird Uracil eingebaut
• Wie läuft die DNA-Replikation ab? - Helikase entwindet die Doppelhelix unter ATP-Verbrauch- DNA-Bindungsproteine halten die Replikationgabel offen- Anlagerung von RNA-Primern an die DNA- ausgehend von den RNA-Primern sythetisiert die DNA-Polymerase III den DNA-Strang in 5´-3´-Richtung (d.h. ein Strang kann nicht kontinuierlich synthetisiert werden)- Die DNA-Polymerase I ersetzt den RNA-Primer durch DNA- Ligase verbindet die von den DNA-Polymerasen synthetisierten Okazaki-Fragmente
• Wie geht die Transkription von statten? (Initiation, Elongation und Termination) - Initiation: Start der Transkription am Promotor des codierenden Stranges durch Bindung der RNA-Polymerase am Promotor, mit Hilfe ihres sigma-Faktors-Elongation: Abkopplung des Sigma-Faktors; Core-Enzm der RNA-Polymerase verlängert de RNA-Kette in 5´-3´-RichtungTermination: RNA-Polymerase erkennt Ende der Transkriptionseinheit und löst sich von der Matrize ab
• Wie geht die Translation von statten? (Initiation, Elongation, Termination) - Initiation: Anlagerung der 30S Untereinheit des Ribosoms an die mRNA; Bindug der Start-t-RNA an das Startcodon AUG in der P-Stelle des Ribosoms; Anlagerung der 50S-Untereinheit- Elongation: Anlagerung der nächsten passenden tRNA an die mRNA in der A-Stelle des Ribosoms; AS-Kette an der P-Stelle, bindet mit ihrer Carbonylgruppe an ie Aminogruppe der AS in der A-Stelle; frei gewordene tRNA der P-Stelle verlässt das Ribosom; Ribosom rückt auf der mRNA um ein Triplett weiter; A-Stelle wird frei- Termination: Ribosom erreicht das Stop-Codon; Beendigung der Proteinsythese; Ribosom zerfällt in Untereinheiten
• Wie viele Chromosomen haben Eukaryonten? 46 Chromosomen:44 Autosomen2 Gonosomen
• Wie werden die Chromosomen voneinander unterschieden? Größe, Lage des Centromers (metazenrisch, submetazentrisch, akrozentrisch, telozentrisch) und spezifische Banden
• Was versteht mann unter Karyotyp und Karyogramm? Karyotyp = Gesamtheit aller Chromosomen eines IndividuumsKaryogramm = grapische Darstellung oder Bezeichnung des Karyotyps
• Welche verschiedenen Chromatinformen gibt es? - Euchromatin: "helles" Chromatin, wird schwächer gefärbt, Chromatin liegt weniger stark kondensiert vor- Heterochromatin: "dunkles" Chromatin, wird stärker gefärbt, Chromatin stärker kondensiert; unterscheidung in konstruktives Heterochromatin (in beiden homologen Chromosomen dicht gepacktes Chromatin) und fakultatives Heterochromatin (in nur einem der homologen Chromosomen dicht gepacktes Chromatin)
• Wie wird ein Karyogramm erstellt? - Gewinnung von weißen Blutzellen durch Blutabnahme- Ansetzen einer Gewebekultur mit Salz, Glucose, Aminosäuren, Nucleotiden, FCS, Heparin, Antibiotika und Phythämaglutinin (-> führt zur Quellung der Lymphozyten)- Zusetzen von Colchizin, um Mitose zu stoppen -> Metaphasestadien häufen sich- Trennung der Lymphozyten von Erys durch Hämolyse und Zentrifuagtion- Verteilung der Chromosomen -> man lässt die Lymphozyten tropfeneise auf Objektträger tropfen -> Lymphozyten platzen, Chromosomen beiten sich nebeneinander aus- Färbung mit Giemsa-Lösung

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