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ad Methoden: Molekularbiologie (Fach) / in vitro-Methoden (Lektion)
Produktion von DNA- und RNA- Molekülen, Extraktion, Reinigung von Nucleinsäuren, Gefriertrocknung, Gelelektrophorese, Restriktion, Ligation, PCR, Sequenzierung, Genomsequenzierung,
Diese Lektion wurde von lunette erstellt.
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- Wie viele Schnittstellen sind für das Restriktionenzym BamHI (Erkennungsstelle GGATCC) statistisch gesehen im menschlichen Genom zu erwarten? Eine Sequenz von 6 bestimmten Nucleotiden hat in einer DNA mit zufälliger Verteilung der 4 möglichen Nucleotide eine Wahrscheinlichkeit von (1/4)6 = 1/4096 = 0,2441‰ → Im menschl. Genom liegen demnach statistisch 3,25 × 109 / 4096 = 7,9×105 Schnittstellen vor.
- Produktion von DNA- und RNA- Molekülen .
- Reinigung von Nucleinsäuren .
- Gefriertrocknung .
- Gelelektrophorese von Nucleinsäuren .
- Extraktion von Nucleinsäuren -> Phenolextaktion zum Abtrennen von Proteinen 3 Phasen: 1. Phenol 2. Phenol/Chloroform 3. Chloroform Zellextrakt wird mit Phenol gemischt und zentrifugiert, in der oberen, wässrigen Phasen setzt sich RNA und DNA ab, in der Grenzphase zusammengeballte Proteine, unten Phenol.
- Restriktion .
- Ligation .
- PCR .
- Sequenzierung .
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- Genomsequenzierung .
- Klonierung .