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Anchem (Fach) / immunanalytische verfahren (Lektion)
- Immunanalytische Verfahren sind analytische Verfahren, bei denen Antikörper als Reagentien eingesetzt werden
- Antikörper sind Proteine, die vom Immunsystem gebildet werden, wenn es auf das Eindringen von bestimmten Fremdstoffen, sogenannten Antigenen, reagiert
- Immunogenität Fähigkeit eines Moleküls eine Immunantwort auszulösen
- Was macht ein Molekül zu einem Immunogen? Molekulargewicht Komplexität Ähnlichkeit mit körpereeignen Proteinen
- Vor- und Nachteile von polyklonalen Antikörper Vorteile:Herstellung rascher und billiger Nachteile: kein reines Reagenslimitierte Mengenicht reproduzierbar herstellbar
- Hybridom-Technik ein Verfahren zur Herstellung von monoklonalen Antikörpern beruht auf der Verschmelzung von B-Lymphozyten mit Myelomzellen Bei der Hybridom-Technik werden antikörperproduzierende Zellen (B-Zellen) mit Myelomzellen (Krebszellen)fusioniert, woraufhin quasi-unsterbliche Hybride entstehen, die monoklonale Antikörper produzieren
- Ablaufschema Hybridomtechnik Immunisierung einer Maus Entnahme von B-Lymphozyten Fusion Hybrid-Selektionierung Antikörper-Screening-Tests Klonierung
- Vor-und Nachteile von monoklonalen Antikörpern Vorteile:reines Reagensunbegrenzte Mengereproduzierbar herstellbar Nachteile:Herstellung zeitaufweniger und teurer
- allgemeine Charakteristika von Immunoassays Einschränkungen durch die Notwendigkeit, die Tertiärstruktur der Antikörper zu erhalten Wegen der Selektivität der Antigen-Antikörper-Wechselwirkungen sind kaum Probenvorbereitungsschritte notwendig Unsicherheitsbereich der Resultate (Präzision: rel.Standardabweichung eines Labors <5%, Richtigkeit: systematische Fehler durch Kreuzreaktivität der Antiköper) Immunoassays sind Screening-Verfahren Zeitbedarf wg.der Möglichkeit der Parallelbestimmung niedrig Kosten
- Immunoassays Kosten (Teil von Allg.Charakteristika) Instrumentation: oft billig, je nach Detektionsmethode Reagentien: AK relativ teuer, Kosten pro Bestimmung niedrig Personal: niedrig, da Methoden automatisierbar sind Qualitätskontrolle: wie bei anderen Verfahren
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