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biogene am (Fach) / Teil 4 (Lektion)

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  • LPLC d -> 200µmp -> 1 barN -> 150
  • MPLC d -> 25µmp -> 40 barN -> 1500
  • HPLC d -> 5µmp -> 250 barN -> 6000
  • UHPLC d -> 2µmp -> 800 barN -> 20.000
  • HPLC vs. GC-Kapillar Länge                 0,25 m   5-105 mBodenzahl/m      32.000    3.000Bodenzahl total  8.000      500.000
  • HPLC Aufbau mobile Phase Mischer Pumpe Injektor Säule Detektor PC
  • Warum kugeliges Kieselgel? Gleichmäßiger zum befüllen -> weniger Eddy-Diffusion
  • UV/Vis-Detektor vs. Diode Array Detektor (DAD) - HPLC UV/Vis: Gitter vor Durchflusszelle danach Detektor DAD: Gitter nach Durchflusszelle und danach DAD
  • Identifizierung von Substanzen - HPLC • Retentionszeit (absolut) tR• Retentionszeit (relativ) r = tR/tRst• Aufstocken (Cochromatographie)• HPLC-DAD, HPLC-MS,...
  • Elutionsmodi Isokratische Elution Gradientenelution
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  • Uvae ursi folium - HPLC mind. 7,0% Arbutin • Extraktion mit Wasser unter Rückfluss• Externer Standard
  • Valerianae - HPLC (mind. 3% äth. Öl, mind. 0,17% Sesquiterpensäuren, ber. als Valerensäure) • Extraktion mit MeOH unter Rückfluss• Interner Std. Dantron• r = 0,7 Acetoxyvalerensre, r = 1,2 Valerensäure
  • Hedera - HPLC (mind. 4,0% Hederacosid C) • Extraktion mit MeOH-Wasser unter Rückfluss• Externer Standard (darf kein a-Hederin gebildet sein!)
  • Allii sativi bulbi pulvis - HPLC (mind. 0,45% Allicin)• Extraktion Wasser (Ultraschall)+MeOH+Ameisensre (schnell!!)• Interner Std. Butyl-4-OH-benzoat
  • Colae semen - HPLC a (mind. 1,5% Coffein)• Extraktion mit MeOH unter Rückfluss• Externer Standard, RCoffein-Theobromin mind. 2,5
  • Liquiritiae radix - HPLC (mind. 4,0% Glycyrrhizinsäure)• Extraktion wässr. NH3 (Ultraschall)• Externer Standard (Ammoniumglycyrrhinat, Eichkurve)
  • Harpagophyti radix - HPLC (mind. 1,2% Harpagosid)• Extraktion MeOH (nicht über 40°C !)• Interner Std. (Methylcinnamat)
  • Ginkgo folium - HPLC (min. 0,5 % Flavonglykoside)• Extraktion mit Aceton/Wasser, Hydrolyse mit HCl -> Aglyka• Externer Std. Quercetin
  • Urticae folium - HPLC (mind. 0,3% Kaffeoylapfelsäure + Chlorogensäure, berechnet als Chlorogensäure)• Extraktion mit 40% MeOH (Ultraschall)
  • Cynarae folium - HPLC (mind. 0,8% Chlorogensäure)• Extraktion mit MeOH (Rückfluss)
  • Piperis fructus - HPLC (mind. 3% Piperin; 2,5% ÄÖ) • Extraktion mit EtOH 96% (Ultraschall)

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