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Instrumentelle Analytik Biochemie (Fach) / Konzentrationsanalytik 3 (Lektion)
- Was ist die Strahlungsleistung? Wie wird diese Größe in der Spektroskopie genannt? Welche Einheiten hat diese Größe? Die Strahlungsleistung (oder Strahlungsfluss) Φ oder Φe ist diejenige differentielle Energiemenge dQ (Q ist die Strahlungsenergie), die pro Zeitspanne dt von elektromagnetischen Wellen transportiert wird. Φe=dQ/dt Einheit: [J*s-1, W] Umgangssprachlich wird die Strahlungsleistung auch „Stärke der Strahlung“ und „Lichtintensität“ genannt.
- Warum ist das Lambert-Beersche-Gesetz ein Grenzgesetz für sehr niedrige Konzentrationen? Nennen Sie drei mögliche Ursachen dafür, dass in realen Fällen Abweichungen von der linearen Beziehung zwischen Extinktion und Konzentration auftreten können. Intermolekulare WW der absorbierten Zentren Änderung des Brechungsindexes mit der Konzentration Chemische Gleichgewichte
- Wodurch wird der elektroosmotische Fluss verursachte und wie kann man ihn unterbinden? EOF ist eine durch Ladungen induzierte Bewegung von Flüssigkeiten entlang einer Phasengrenze in einem elektrischen Feld EOF spielt zentrale Rolle in Kapillarelektrophorese → treibende Kraft entsteht dabei direkt an der Kapillarwand, sodass die entstehende Flüssigkeitsbewegung über den ganzen Querschnitt der Kapillare gleichförmig ist → Eliminierung durch beschichten der Kapillarwand mit unpolarem Stoff (PEG)
- Erklären Sie das Prinzip SDS-PAGE. · sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis · eine analytische Methode der Biochemie zur Trennung von Stoffgemischen nach der Molekülmasse in einem elektrischen Feld · Trennmedium: dikontinuierliches Gel auf Polyacrylamid-Basis → anionische Detergenz → überdeckt die Eigenladung von Proteinen · negative Ladung der Proteine bewirkt Abstoßung + Denaturierung (Aufkochen) ermöglicht Linearisierung → Erlaubt Auftrennung nach Kettenlänge, proportional zur Molekülmasse · nach Anlegen der Spannung wander die negativen Moleküle zur Anode → Gel wie Trennsieb, da kleine Moleküle schneller, größere Moleküle langsamer durch die Maschen schlüpfen
- Erklären sie die Zonenelektrophorese. · erlaubt Trennung von geladenen Teilchen in einem homogenen Puffersytem mit konst. pH-Wert durch ein elektrisches Feld · Trennung erfolgt nach elektrophoretischer Mobilität und Ladungsdichte der Teilchen · je stärker ein Teilchen geladen ist, desto weiter bewegt es sich im elektrischen Feld
- Welche Vorteile hat die AAS gegenüber der AES bei gleicher Plasmatemperatur? · sehr selektiv: auch Spuren von Elementen nachweisbar · geringe Probemenge nötig · relativ schnell · linienarmeres Spektrum (leichter überschaubar)
- Erklären Sie stichpunktartig welche Prozesse (Verdampfung d. Lösg., usw.) bei der AES von wässrigen Metallsalzlösungen ablaufen (von der Lösung bis zur Generierung des Signals). 1. Probe wird zerstäubt; meist Zerstäuber selbstansaugend, aber häufig mit Pumpe gespeist 2. zerstäubte Probe wird mit Brenngas gemischt und in Brenner geleitet 3. Lösungsmittel verdampft, Metallsalz bleibt zurück und verdampft ebenfalls 4. Salz dissoziiert → (Bsp: NaCl) NaCl(s) = NaCl(g) = Na(g) + Cl(g) 5. Teil der gasfö. Atome wird thermisch angeregt → Na(g) = Na*(g) 6. Bei Rückkehr der Elektronen in Grundzustand: erfolgt Emission v. Licht (Na bei λ = 589 nm) 7. Durch Monochromator wird die zur Messung günstige Resonanzlinie nach ihrer Wellenlänge selektiert 8.Diese wird dann auf den Detektor geleitet
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