• Stimulator (Wachstumsfaktor, Zellkulturmedien mit unbekannten Wachstumsfaktoren) und ein Zellkultursystem• Durchführung einer Dosis-Wirkung oder eines Zeitverlaufes der Wirkung des Stimulators• Am Ende der Reaktion: Abstoppen der Zellreaktion mit kaltem PBS• Ablösen der Zellen für die Proteingewinnung• Der Lysis-Buffer enthält zB Detergentien, Enzyminhibitoren• Auftrennen mit SDS-Polyacrylamid-gelelektrophorese• Transfer der Proteine vom Gel auf feste Membranen (Nitrozellulose)• Detektion der aktivierten Proteine mittels spezifischer Antikörper• zB Nachweis von aktiviertem ras, aktivierter MAP-kinase, src• Hemmen mittels spezifischer Inhibitoren (Herbymycin, Genistein für Phosphorylierungen an Tyrosinen) zur Untersuchung des Wirkungsmechanismus