Mikrobiologie (Fach) / Pilze, Viren, Genetik bei Prokaryoten (Lektion)

Vorderseite Was versteht man unter rRNA-gerichtete Oligonukleotidsonden (FISH)?
Rückseite

rRNA-gerichtete Oligonukleotidsonden (FISH = Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung)

  • In-situ-Hybridisierung (ISH) = molekularbiologische Nachweis von Nukleinsäuren (RNA, DNA) → in Geweben, einzelnen Zellen oder auf Metaphase-Chromosomen.
  • Dabei wird eine künstlich hergestellte Sonde probe aus einer Nukleinsäure eingesetzt, die über Basenpaarungen an die nachzuweisende Nukleinsäure bindet (Hybridisierung).⇒ Sonden-DNA + Ziel-DNA werden zu Einzelsträngen aufgeschmolzen. = Paarung von komplementären Basen Sonde-DNA- & Ziel-DNA-Einzelsträngen.
  • Bei der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) wird die Sonde mit Hilfe eines fluoreszierenden Farbstoffes nachgewiesen⇒ ermöglicht den gleichzeitigen Nachweis mehrerer Strukturen durch den Einsatz verschiedener Fluoreszenzfarbstoffe, z. B. Nachweis eines Chromosoms mit zwei darauf liegenden Genen

  • Phylogenetische Stammesgeschichte Farbstoffe = markierte Sonde = z. B. Oligonukleotid + Cy3 (Fluoreszenz-Farbstoff Cyanin), die in ihrer Basensequenz zu konservierten Sequenzen der 16S-rRNA (Prokaryoten) komplementär bindet. ⇒ leuchten unter Fluoreszenz-Mikroskop

Diese Karteikarte wurde von melxying erstellt.