1. Krankheitserreger muss immer mit Krankheit assoziiert sein und darf in gesunden Tieren nicht nachgewiesen werden

2. Der mutmaßliche Erreger muss in Reinkultur gezüchtet werden

3. Reinkultur (1.) des mutmaßlichen Erregers muss im gesunden Tier die Krankheit auslösen -> Überprüfung durch Infektion

4. Der krankheitsinduzierende Organismus muss reisoliert werden, sodass Reinkultur (2.) mit dem ursprünglichen Erreger identisch sein muss